FRETに使用されるフルオロフォア

生物学的使用のための1つの一般的なペアの蛍光体は、シアン蛍光タンパク質（ CFP ）–黄色蛍光タンパク質（ YFP ）ペアです。どちらも緑色蛍光タンパク質のカラーバリアントです（ GFP ）。有機蛍光色素による標識には、精製、化学修飾、および宿主タンパク質の細胞内注入が必要です。 GFP 変異体は、遺伝子工学により宿主タンパク質に結合させることができます。同様に、 CFP と YFP （タンデムダイマー）の融合は、プロテアーゼ切断連結によってリンクされ、切断アッセイとして使用できます。

BRET

FRET の制限は、フルオロフォアドナーで実行されるため、蛍光伝達を開始するための外部照明の要件であり、アクセプターの直接励起または photobleaching への結果にバックグラウンドノイズが発生する可能性があります。この欠点を回避するために、生物発光共鳴エネルギー転移（またはBRET）が開発されました。この技術は、生物発光ルシフェラーゼ（典型的には、ウミシイタケルシフェラーゼからのreniformis）の代わりに、より使用 CFP と互換性のある初期の光子放射を生成する YFP を。

画像080A | フェルスター共鳴エネルギー移動の概念の漫画図（ FRET ）。| Curtis Neveu（https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png)、"Concept of FRET "、https：//creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode from Wikimedia Commons

作者 : Yavor Mendel

参考文献：

分子生物学のテクニックI

分子生物学のテクニックIII